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MLO-Y4 細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

MLO-Y4 細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:
白果新酸麥迪康 一次性活性炭口罩(四層) 白色 50只/盒 10盒/箱 Caspase-9(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)
白花前胡素雙氫 中檢所 100mg CASPASE-9蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒

更新時(shí)間:2021-08-30
訪問次數(shù):1131
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注意事項(xiàng):
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè),時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間,同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè),這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
產(chǎn)品名稱:小鼠骨樣細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱:MLO-Y4 細(xì)胞

貨號(hào):LZ-X969657
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁

圖片2.jpg 

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凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

圖片2.jpg 

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
   1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
實(shí)驗(yàn)材料: 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊; 
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把; 
8、酒精燈1臺(tái);

大車前苷固相RNase清除劑 冰凍切片組織線粒體復(fù)合物V蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒

大豆苷固相RNase清除劑 冰凍切片組織組蛋白H3-K4甲基化NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒

大豆苷元液相RNase清除劑 冰凍切片組織組蛋白H3-K9甲基化NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒

大豆皂苷AaRNAsaver(RNA長效保存液) 冰凍切片組織組蛋白NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒

大豆皂苷AbEB染色液 溴化乙錠   紅色熒光核酸染料   GoldView   gelred  (10000X) 二(MDA)終點(diǎn)比色法定量檢測(cè)試劑盒

大豆皂苷AcEB染色液 溴化乙錠   紅色熒光核酸染料   GoldView   gelred  (10000X) 茶水氟元素比色法定量檢測(cè)試劑盒

大豆皂苷BaGoldView I型核酸染色劑(10000×) 超氧化物歧化酶(SOD)活性終點(diǎn)比色法定量檢測(cè)試劑盒

大豆皂苷BbGoldView II型核酸染色劑(5000×) 超氧陰離子自由基終點(diǎn)比色法定量檢測(cè)試劑盒

大豆皂苷BdSYBR Green I(電泳級(jí),10000×) 蛋白免疫共沉淀分析試劑盒-LEPTIN

大豆皂苷BeSYBR Green I(電泳級(jí),10000×) 電鏡樣品固著液(Karnovsky固著液)

大豆皂苷Be甲酯SYBR Green I(電泳級(jí),10000×) 豆制品維生素U(S-Methylmethionine)比色法定量檢測(cè)試劑盒

大果桉BSYBR Green II(電泳級(jí),10000×) 鈣ATP酶PMCA蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒

大花羊藿苷FSYBR Green I(電泳級(jí),20X) 鈣ATP酶SERCA蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒

大黃酚SYBR Green II(電泳級(jí),10000×) 鈣鈉交換體(NCX)蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒

大黃酚-8-O-葡萄糖苷SYBR Green II(電泳級(jí),10000×) 肝脾組織樣品固著液(Helly固著液)
MLO-Y4 細(xì)胞氧氣調(diào)節(jié)蛋白150抗體酯封端左旋聚乳(重均分子量206-288萬) Hydrazine sulfate

氧化應(yīng)激反應(yīng)蛋白1抗體酯封端左旋聚乳(重均分子量26-36萬) Cyclandelate

固生蛋白M抗體酯封端左旋聚乳(重均分子量3-5.5萬) Nitrilotriacetic acid

末端多聚腺苷1蛋白抗體酯封端左旋聚乳(重均分子量36-48萬) 1,3- Propylene Glycol

嗅球蛋白3抗體酯封端左旋聚乳(重均分子量48-73萬) Diethylene Glycol

轉(zhuǎn)錄因子OTX1抗體酯封端左旋聚乳(重均分子量5.5-9 萬) Chlorothiazide

轉(zhuǎn)錄因子OTX2抗體酯封端左旋聚乳(重均分子量73-102萬) 4-amino-6-chloro-1,3-benzenedisulfonamide

轉(zhuǎn)錄因子OTX1+OTX2抗體酯封端左旋聚乳(重均分子量9-17萬) Alkene

增食欲素B/欲激素B(3R,4R)-N,4-二-1-(苯)-3-... N-Methylparoxetine

 


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TEL:021-61210612

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